Lorsqu’ils sont secs, rajouter de l’eau du robinet (environ 5L pour le grand pédiluve). Si besoin, ajouter quelques mL de 3D Bio.
Nettoyer les filtres bleus au bas des racks
Ces filtres s’encrassent rapidement. Il faut les nettoyer 2 fois par semaine, sous peine qu’ils débordent. Les sortir des racks, les laver dans l’évier avec la douchette et en frottant à la main. Les rincer à l’eau du système, les remettre en place.
Elevage des alevins
Incubation
Les œufs sont placés dans l’incubateur à 28°C en salle Microscopie n°84-20-51. Ils y resteront pendant 5 jours avant d’être montés à l’animalerie au 6e jour.
Au stade approprié, et si nécessaire, effectuer la sélection (fluorescence souvent) des embryons à conserver. Les critères de sélection sont normalement indiqués pour chaque lignée dans la base de données. Demander à l’utilisateur final au moindre doute.
A 24h après fertilisation, les œufs sont désinfectés à la javel (protocole ici) puis replacés dans l’incubateur.
Le milieu doit être propre et ne doit plus contenir de coquilles vides ou d’œufs morts.
Remettre les larves dans l’incubateur.
Changer l’eau de la boîte tous les jours jusqu’à 6 jours.
Au 6e jour, monter les alevins sur la paillasse de l’animalerie, où elles seront nourries. En effet les larves ont consommé leur réserve vitelline, leurs yeux se sont développés et leur bouche s’est ouverte. Elles sont alors prêtes à recevoir leur première alimentation.
Entretien des œufs dans les boîtes de pétri
Les œufs resteront dans leur boîte de pétri et sur la paillasse pendant 2-3 jours. Il est alors nécessaire de changer leur eau d’origine 1 fois le matin et une 1 fois en fin de journée.
L’ancienne eau est donc retirée avec une pipette plastique puis remplacée par de l’eau du Système Principal (serpentin bleu) jusqu’à la moitié de la hauteur de la boîte de pétri.
Chaque changement d’eau est suivi d’un nourrissage avec des paramécies.
A l’aide du pipetboy nourrir les larves avec des paramécies précédemment filtrées (protocole ci-dessous). Les larves doivent être « noyées » de paramécies.
On peut commencer à observer au bout du 2ème jour, voire du 1er jour, une petite tache blanche au niveau du ventre des larves signe qu’elles mangent bien les paramécies.
Guide des bonnes pratiques
Système à l’arrêt complet
Système à l’arrêt complet = plus d’alimentation électrique = écran éteint, pas de réponse au toucher.
- Vérifier que l’interrupteur principal en façade (bouton vert) n’a pas été commuté sur 0 par erreur.
- Si ce n’est pas le cas, il s’agit d’un problème d’alimentation électrique.
Absence de circulation d’eau
Les poissons peuvent rester 48h sans renouvellement d’eau. Dans ce cas, ne pas nourrir les adultes, pour éviter une montée de l’ammoniaque ou des nitrites.
Le principal problème est qu’en absence de circulation d’eau, l’eau n’est plus chauffée. Or, par évaporation, elle va se refroidir rapidement (plusieurs degrés sur 12h). Pour limiter cette chute de température:
- fermer les couvercles (aquariums et grands bacs sous les racks).
- au besoin arrêter la CTA, pour laisser l’humidité monter dans la pièce, ce qui limitera l’évaporation.
L’absence de circulation d’eau peut-être dûe à un arrêt complet du système ou un arrêt spécifique des pompes. Pour différencier les deux, regarder si l’écran est bien allumé, si le système répond, etc.
Reconnaître Mâle / Femelle
Distinguer les mâles des femelles n’est pas forcément simple, certains animaux étant d’ailleurs parfois impossible à caractériser (le plus souvent ces animaux sont de toute façon peu fertiles, et mieux vaut ne pas les utiliser si possible). Il ne faut donc pas hésiter à demander de l’aide, en particulier si mâle et femelle ne sont pas de la même lignée et qu’une confusion entrainerait un mélange de lignées.
Les différences entre mâles et femelles varient également d’un fond génétique à un autre. Vous trouverez de ce fait ci-dessous différents exemples de critères d’identification. Les principaux:
– mâle plus jaune/rose que la femelle
– mâle plus actif. En particulier, dans les bacs d’accouplement, les mâles ‘courent’ après les femelles, en leur stimulant les flancs.
– mâle au corps plus longiligne / femelle avec le ventre plus rond. Attention cependant, après avoir pondu, le ventre des femelles est beaucoup moins rond. Une femelle qui était très facilement identifiable lorsque les croisements ont été mis en place peut devenir beaucoup plus difficile à repérer.
Croisements
Demande de croisements auprès d’Emilie
En temps normal, les croisements sont gérés par Emilie (mise en place des croisements, récupération des œufs, rangement des animaux). Pour demander des croisements, utiliser le doc partagé. Pour la première utilisation, demander à Emilie de vous ajouter à la liste des personnes autorisées à accéder au document. Si vous demandez des nouveaux croisements, pensez aussi à avertir directement Emilie.
Si vous deviez gérez vous même vos croisements:
Heure de mise en reproduction : au plus tôt 16h00
Heure de récupération des œufs le lendemain matin : au plus tard 11h00 – 12h00 (au-delà les poissons commenceront à montrer des signes de souffrance)
Liste du matériel nécessaire :
- Boite
- Panier
- Séparateur
- Couvercle
- Scotch coloré pour inscrire la provenance des poissons
- Eau d’élevage
1. Préparation des boites
Ajouter de l’eau (serpentin bleu) presque jusqu’en haut de la boite (toute la grille doit être couverte).
L’eau doit être prise dans le tuyau bleu souple (serpentin). Cette eau est de l’eau du système, qui a été filtrée et stérilisée aux UV. Le débit de ce tuyau est faible, et remplir beaucoup de boites peut prendre du temps. Il est tentant de prendre de l’eau directement au pied des racks, dans la grande cuve bleue. Cela pose 2 risques :
- Un risque sanitaire : cette eau est un mélange de toutes les sorties des aquariums du rack, elle a donc le statut sanitaire du pire aquarium du rack
- Un risque de mélange de lignées : des œufs peuvent sortir des aquariums et des poissons grandissent dans la cuve bleue. Si vous prenez un adulte, vous le verrez, mais si vous prenez des alevins ou des œufs, vous ne les verrez pas. Ils seront donc collectés en même temps que vos œufs du jour, conduisant à un mélange de lignées.
La conclusion est qu’il faut utiliser l’eau du serpentin bleu. Si vous n’avez vraiment pas le temps, vous pouvez prendre de l’eau dans le bac bleu (utiliser une boite vide pour prendre l’eau). Verser là ensuite dans votre boite d’accouplement à travers le tamis disponible sur l’étagère, au-dessus de l’évier. Cela n’évitera pas le risque sanitaire, mais filtrera d’éventuels œufs ou alevins.
2. Étiquetage
L’étiquette est à mettre impérativement sur le panier contenant les poissons
3. Mettre les poissons
Une fois l’eau mise dans toute les boites, placer les poissons en mettant les males d’un côté et les femelles de l’autre de part et d’autre du séparateur centrale.
Penser à mettre les couvercles afin que les poissons ne sautent pas de la boîte
4. Noter les croisements
Si ce n’est déjà, noter, sur le fichier de suivi en ligne, les reproductions effectuées
5. Accouplement
Le lendemain dès que la lumière de l’animalerie s’allume enlever les séparateur en pensant à remettre les couvercles.
Les mâles vont « courir » après les femelles en essayant de les ramener là où il y a peu d’eau. La fécondation des œufs est externe. Les œufs fécondés tombent alors à travers le panier.
6. Récupérer les œufs
Au préalable, préparer les boîtes de pétri :
Si les embryons vont être utilisés pour des expériences, noter sur le couvercle de quoi les identifier, idéalement, noter également le fond e la boite.
Si les embryons vont être élevés :
- Annoter au feutre noir le couvercle et le fond de la boîte en indiquant :
- Le numéro de la nouvelle lignée
- La date du jour de ponte
- Le numéro de Batch et d’aquarium du père, Le numéro de Batch et d’aquarium de la mère.
Une fois toutes ces informations notées mettre un peu d’eau dans les boîtes de pétri avec l’eau du système (serpentin bleu).
Les boîtes de pétri sont alors prêtes pour recevoir les œufs.
Récupérer les œufs en versant l’eau de la boite concernée dans la petite passoire en plastique préalablement rincée. Il y aura certainement des fèces que l’on peut enlever en rinçant délicatement mais abondamment avec l’eau du serpentin bleu.
Une fois que les œufs sont propres, retourner la passoire dans la boîte de pétri associée en appuyant sur le dessus afin de décoller les œufs de la passoire avec l’eau de la boîte de pétri.
Refermer la boîte et mettre de côté.
Rincer correctement la passoire afin de ne laisser aucun œuf. Dans le doute changer directement de passoire puis recommencer la manip pour les autres lignées.
Il est fortement conseillé de s’organiser, de faire la récolte des œufs lignée par lignée dans le but d’éviter tout mélange des œufs.
Une fois terminé placer les œufs dans l’incubateur et signaler à la personne concernée qu’il y a des œufs pour elle.
Si des œufs sont potentiellement mélangés :
Ne pas ignorer la situation, cela peut arriver, dans un premier temps expliquer la situation à la personne concernée par la lignée afin qu’elle soit au courant et puisse prendre la meilleure décision.
Les lignées où l’on a un doute ne sont surtout pas à mettre en élevage dans l’animalerie, il vaut mieux recommencer la reproduction en question la semaine suivante.
7. Rangement des couples
Ranger avec attention les couples dans leur boîte respective, pour cela, prendre une épuisette propre et les ranger lignée par lignée en s’assurant de ne pas faire de mélange.
Une fois tous les poissons remis à leur place, nettoyer/rincer soigneusement à l’eau chaude toutes boites et panier. Les mettre à sécher sur le bord de la paillasse.
Une fois tous les poissons remis à leur place, s’il n’y a pas d’œufs à récupérer nettoyer/rincer toutes boites et les mettre à sécher sur le bord de la paillasse.
Arrêt de la CTA
En cas d’arrêt de la CTA, l’humidité va rapidement augmenter dans la pièce. Cela pose 2 problèmes:
– si l’humidité monte trop, l’eau va condenser au plafond, il va pleuvoir dans la pièce, ce qui risque d’endommager le plafond et le matériel.
– Le stand alone risque de chauffer car en temps normal, sa température est limitée par l’évaporation (l’eau est chauffée par la pompe et les UV, l’évaporation d’eau refroidit le système).
On peut tenter de redémarrer nous même la CTA:
Sur l’armoire de commande (Armoire B3 au 3e etage, CTA B6). Le bouton noir de la CTA B6 est sur ‘Auto’. Le basculer sur ‘Arret’, puis le remettre sur ‘Auto’. Appuyer plusieurs secondes sur le bouton ‘réarmement’ jusqu’à ce que les voyants verts et rouge clignotent. Vérifier que la CTA redémarre bien.
Si elle ne redémarre pas, en journée appeler Mr Thavone (DPI; poste 29 14), la nuit/Week-end appeler les pompiers (34 33) pour qu’ils fassent venir Gesten.
En attendant, ou si la panne s’annonce longue:
Il est possible d’éviter l’augmentation d’humidité pendant plusieurs heures en procédant comme suit:
- Bloquer les portes en position semi-ouvertes, à l’aide de sceaux de sel (sceaux sous les étagères et/ou dans la réserve en face). L’expérience montre qu’avec les portes ouvertes, l’humidité semble se maintenir à un taux raisonnable sur une nuit au moins. Ne PAS utiliser les poubelles pour bloquer les portes, elles ne tiennent pas en place.
- Au besoin, couvrir tous les aquariums ainsi que les bacs au pied des batteries dans le système principal (pas dans le stand alone, dont on doit favoriser l’évaporation pour qu’il ne chauffe pas trop).
- Si la température monte trop dans les systèmes (stand alone surtout), l’arrêter.
Attention, au redémarrage de la CTA, la température de la pièce va redescendre, et les courants d’air favoriser l’évaporation d’eau (donc le refroidissement de l’eau): il faut donc absolument rallumer les systèmes.
Relancer le système de monitoring
Si le système est toujours en route
(mais qu’il affiche toujours les mêmes valeurs; cas le plus fréquent). Il faut commencer par quitter arrêter le système, pour le relancer. Pour cela, trouver la fenêtre dans laquelle s’affichent les mesures en bleu:
Fermer cette fenêtre. Au message d’alerte, confirmer que vous voulez fermer la fenêtre.
Trouver la fenêtre contenant le code python:
Une fenêtre va s’ouvrir, et au bout d’une minute, les premières mesures vont s’afficher (en bleu). Si rien ne s’affiche, ou si apparait un message d’erreur (en rouge). Fermer cette fenêtre. Débrancher et rebrancher la prise USB (blanc/gris). Relancer le module (fenêtre avec le code, Run/Run Module.
Si le système est arrêté
(suite à un redémarrage du PC notamment).
Trouver sur le bureau le fichier Lob.py-Raccourci. Clic droit, sélectionner Edit with IDLE.
S’ouvre alors la fenêtre contenant le code. Lancer le module en faisant Run/ Run Module
Une fenêtre va s’ouvrir, et au bout d’une minute, les premières mesures vont s’afficher (en bleu).
En cas de souci, appeler Nicolas au 06 22 53
51 19